巨噬細胞清除ClodronateLiposomes氯膦酸二鈉脂質體巨噬細胞清除劑

產品簡介：

清除巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(depletion of macrophages)是研究巨(ju)噬(shi)細(xi)胞功能(neng)的(de)重要方法。荷蘭阿姆斯(si)特丹(dan)Vrije University 的(de)Nico van Rooijen教授(shou)開發的(de)一款Clodronate Liposomes，可以(yi)利用巨(ju)噬(shi)細(xi)胞的(de)內吞機制(zhi)，將脂質體包裹的(de)膜不通透性的(de)氯磷(lin)酸(clodronate)帶(dai)入細(xi)胞內，利用“特洛(luo)伊(yi)木馬機制(zhi)"從而達(da)到去除巨(ju)噬(shi)細(xi)胞的(de)目的(de)。

作用原理:

兩親性(xing)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)子(zi)在(zai)(zai)水中可以形(xing)成(cheng)同心圓形(xing)式的(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分(fen)子(zi)層球體(ti)(ti)，磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分(fen)子(zi)層中間(jian)(jian)通(tong)過(guo)(guo)(guo)水相(xiang)分(fen)隔。溶(rong)解在(zai)(zai)水溶(rong)液中的(de)(de)氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽(yan)(yan)在(zai)(zai)形(xing)成(cheng)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)(de)過(guo)(guo)(guo)程(cheng)中被包裹進磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分(fen)子(zi)層之間(jian)(jian)的(de)(de)水相(xiang)中(如(ru)圖1)。游離的(de)(de)氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽(yan)(yan)不(bu)能自由的(de)(de)通(tong)過(guo)(guo)(guo)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分(fen)子(zi)層。隨著脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)被巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)吞噬(shi)，在(zai)(zai)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)酶體(ti)(ti)磷(lin)(lin)酸酶的(de)(de)作用下，溶(rong)解在(zai)(zai)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)水相(xiang)中的(de)(de)氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽(yan)(yan)就可以被逐(zhu)步釋(shi)(shi)放(fang)出來，并累積在(zai)(zai)細(xi)胞(bao)內，當其達(da)到(dao)一定濃度時，巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)將會(hui)受到(dao)不(bu)可逆轉的(de)(de)損(sun)傷，從而進入(ru)凋亡過(guo)(guo)(guo)程(cheng)。從死亡的(de)(de)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)中釋(shi)(shi)放(fang)出來的(de)(de)氯(lv)(lv)磷(lin)(lin)酸鹽(yan)(yan)在(zai)(zai)細(xi)胞(bao)外(wai)的(de)(de)半衰期極短(duan)(大約15min)，可以通(tong)過(guo)(guo)(guo)泌尿系(xi)統排除(chu)體(ti)(ti)外(wai)。

CLODRONATE LIPOSOMES

氯膦(lin)酸鹽脂(zhi)質體

SKU: C-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體C-005構(gou)成：

氯膦酸鹽脂質體：

由(you)同心磷脂(zhi)雙(shuang)層構成(cheng)的(de)(de)人(ren)造球(qiu)，該雙(shuang)層包裹著含有氯(lv)膦酸鹽的(de)(de)PBS（磷酸鹽緩沖液）水溶(rong)液。脂(zhi)質體是(shi)顆粒(li)，大小大。3微米。它們在PBS中形(xing)成(cheng)懸(xuan)(xuan)浮(fu)液，在儲存時會沉淀，在試管或燒瓶的(de)(de)底部(bu)形(xing)成(cheng)沉淀。在對實(shi)驗動(dong)物給(gei)藥(yao)之前，應先搖晃懸(xuan)(xuan)浮(fu)液，以回收均勻的(de)(de)懸(xuan)(xuan)浮(fu)液。

對照脂質體（PBS）：

對(dui)照脂質體不含(han)氯(lv)膦酸鹽。它們僅含(han)有PBS，可用于對(dui)照實驗，以查明注射氯(lv)膦酸鹽脂質體后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細胞(bao)耗竭所致。

clodronateliposomes脂質體C-005產品描述(shu)

磷(lin)(lin)脂(zhi)雙層由磷(lin)(lin)脂(zhi)酰膽堿和膽固醇組(zu)成。將所(suo)有脂(zhi)質體制劑懸(xuan)浮(fu)在無菌磷(lin)(lin)酸鹽(yan)緩沖鹽(yan)水（PBS）中：

– 10 mM的Na2HPO4；

– 10毫米NaH2PO4；

– 140毫米氯化鈉。

我(wo)們所(suo)有的(de)(de)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)均帶負電荷，因(yin)此(ci)不(bu)會一起阻塞。懸(xuan)浮液中的(de)(de)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)沒有大(da)小，這意(yi)味著它也包含越(yue)來(lai)越(yue)大(da)的(de)(de)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)（大(da)3微米）。平均而言(yan)，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)的(de)(de)大(da)小為1.7微米。

氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)脂質體(ti)：人工制(zhi)備(bei)的脂質囊泡(pao)的懸(xuan)浮液，包裹了氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)。懸(xuan)浮液中(zhong)氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)的濃度約為。5毫克/毫升 氯(lv)(lv)膦(lin)酸鹽(yan)(yan)以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封(feng)裝在脂質體(ti)囊泡(pao)中(zhong)。

PBS脂質(zhi)體：人工(gong)制備(bei)的脂質(zhi)囊泡的懸浮(fu)液，其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽，可用于對照實(shi)驗(yan)。

熒光DiI脂質體：人工制備的(de)(de)脂質囊泡的(de)(de)懸浮(fu)液(ye)，其(qi)中包封了PBS水溶液(ye)，并用(yong)熒光染料DiI標記。它們(men)不含氯膦酸鹽，可(ke)用(yong)于研究(jiu)通過特定給藥途徑注射的(de)(de)脂質體是否能夠到達要研究(jiu)的(de)(de)巨噬(shi)細胞。

儲存和使用說明(ming)

到達脂(zhi)質(zhi)(zhi)體后，應將其儲(chu)存在4 – 8oC（或39 – 47oF）之間。脂(zhi)質(zhi)(zhi)體懸浮液不得冷凍，也不要暴露于高(gao)溫(wen)下。這可(ke)能(neng)會對(dui)磷脂(zhi)雙層造成干(gan)擾，可(ke)能(neng)導致氯(lv)膦酸鹽從脂(zhi)質(zhi)(zhi)體中泄漏出(chu)來。

給藥前，首先使脂(zhi)質體(ti)達到室溫，然后輕輕搖動(dong)或攪(jiao)拌(ban)懸浮液(ye)。一段時間后，脂(zhi)質體(ti)易于沉淀(dian)，導致(zhi)小瓶中的分布不(bu)均勻。當注射(she)花費太多(duo)時間時，脂(zhi)質體(ti)甚至可(ke)能在注射(she)器中沉淀(dian)。如果(guo)使用同(tong)一注射(she)器注射(she)多(duo)只動(dong)物，可(ke)能會導致(zhi)劑(ji)量不(bu)同(tong)。

不建議稀釋懸浮液，但如有必要(yao)，請使用PBS或鹽水(shui)。

我們建議客戶在(zai)發貨后16周內(nei)使用脂質體制(zhi)劑。強烈建議不(bu)要在(zai)到(dao)期日期之后使用。在(zai)此期間(jian)之后，污(wu)染的風險會(hui)增加，并且可能會(hui)發生(sheng)輕微(wei)的功能喪失。

作用機理

巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在免(mian)疫和(he)非(fei)免(mian)疫防御(yu)機制中起重要(yao)作(zuo)用。它們是抵(di)御(yu)滲透到脊椎動物(wu)體內的細(xi)菌，病毒和(he)其(qi)他形式的微(wei)生(sheng)物(wu)污染(ran)的首道防線。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是大型細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，幾乎存在于所有(you)(you)身體組織中，它們可以具有(you)(you)不同的形式和(he)名(ming)稱（例如庫(ku)普弗細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，肺(fei)泡巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，小膠質細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，破骨細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，紅(hong)髓巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)）。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)“清除(chu)"，它們攝(she)入并消化(hua)可能是潛在病原體的所有(you)(you)異物(wu)，微(wei)生(sheng)物(wu)，癌細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)碎(sui)片。該(gai)過程稱為吞噬(shi)(shi)作(zuo)用。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)主要(yao)通過可溶性分(fen)子如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)因子和(he)趨化(hua)因子的介導來進一步(bu)調節許多非(fei)吞噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的功能。他們參與先天(tian)免(mian)疫，

脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)是人工(gong)制備(bei)的(de)球體(ti)，由同心磷脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)組成。當磷脂(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)散在(zai)(zai)水中(zhong)(zhong)(zhong)時(shi)，親(qin)水性頭(tou)部(bu)將(jiang)構成脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)的(de)兩個外部(bu)部(bu)分(fen)，而(er)疏(shu)水性脂(zhi)(zhi)(zhi)肪酸基團將(jiang)構成內部(bu)部(bu)分(fen)（見(jian)圖1）。水室分(fen)隔雙(shuang)層(ceng)(ceng)，親(qin)水分(fen)子可以溶解(jie)在(zai)(zai)其中(zhong)(zhong)(zhong)，形成脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)包(bao)封的(de)分(fen)子。氯膦(lin)酸鹽(yan)（二氯亞甲基雙(shuang)膦(lin)酸酯或Cl2MBP）是一(yi)種親(qin)水性分(fen)子，可以封裝在(zai)(zai)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)中(zhong)(zhong)(zhong)。游離氯膦(lin)酸鹽(yan)不易穿(chuan)過(guo)(guo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜，并通過(guo)(guo)腎臟系統從循環中(zhong)(zhong)(zhong)迅(xun)速清除（即數分(fen)鐘內）。但是，氯膦(lin)酸鹽(yan)脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)包(bao)埋在(zai)(zai)脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)中(zhong)(zhong)(zhong)時(shi)，會被巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)吞噬(shi)(shi)，無法逃脫（見(jian)圖2）。磷脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)被溶酶(mei)體(ti)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)酶(mei)消化，而(er)氯膦(lin)酸鹽(yan)未被消化并且保留(liu)在(zai)(zai)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)中(zhong)(zhong)(zhong)。巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)攝入(ru)的(de)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)和脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)越(yue)多，在(zai)(zai)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內積累的(de)氯膦(lin)酸鹽(yan)越(yue)多。超過(guo)(guo)一(yi)定的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內濃(nong)度(du)，氯膦(lin)酸鹽(yan)將(jiang)通過(guo)(guo)啟動程序性細(xi)(xi)胞(bao)(bao)死亡（即凋亡）來消除巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。

圖(tu)(tu)1.氯(lv)膦(lin)酸鹽脂(zhi)質體的(de)示(shi)意(yi)圖(tu)(tu)。囊泡由(you)同(tong)心的(de)磷脂(zhi)雙層構成(cheng)，被水(shui)性(xing)隔室隔開。雙層由(you)親水(shui)和疏水(shui)基團(tuan)組(zu)成(cheng)。將氯(lv)膦(lin)酸鹽（在(zai)此以黑色(se)方塊表示(shi)）溶解在(zai)水(shui)溶液中并封裝在(zai)脂(zhi)質體內(nei)。

圖(tu)2.巨噬細(xi)胞(bao)(bao)對氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質體(ti)的(de)攝(she)取和消化示意圖(tu)。巨噬細(xi)胞(bao)(bao)通(tong)過胞(bao)(bao)吞(tun)作用攝(she)入氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質體(ti)，然后與含有磷(lin)脂(zhi)酶(mei)的(de)溶酶(mei)體(ti)（L）融合（箭頭）。磷(lin)脂(zhi)酶(mei)破壞的(de)磷(lin)脂(zhi)雙層越(yue)多，在巨噬細(xi)胞(bao)(bao)內釋放的(de)氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽(yan)（黑色方塊）越(yue)多。巨噬細(xi)胞(bao)(bao)終通(tong)過凋亡被殺(sha)死。（N =巨噬細(xi)胞(bao)(bao)核）。

因(yin)此(ci)，氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質(zhi)體(ti)(ti)可(ke)用于通(tong)過(guo)(guo)消耗巨(ju)噬(shi)細胞來研究(jiu)巨(ju)噬(shi)細胞功能。例如，它們(men)可(ke)以應用于各種自身免疫性疾(ji)病，移植，神經系統(tong)疾(ji)病和基因(yin)治(zhi)療的(de)模型。氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質(zhi)體(ti)(ti)只有(you)在可(ke)以達到(dao)的(de)情況下才(cai)能耗盡巨(ju)噬(shi)細胞。一(yi)些組織可(ke)以形成(cheng)脂質(zhi)體(ti)(ti)的(de)屏障。通(tong)過(guo)(guo)選擇氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質(zhi)體(ti)(ti)的(de)正確(que)給藥(yao)途徑，可(ke)以耗盡特定的(de)器官或(huo)組織的(de)巨(ju)噬(shi)細胞。有(you)關管理(li)協議的(de)更多信息，請單擊此(ci)處。

PBS脂(zhi)質(zhi)(zhi)體主要用(yong)(yong)于對(dui)照(zhao)實(shi)驗。但是，這些也可(ke)以(yi)在某些時(shi)(shi)間段內通過飽和(he)(he)來阻止吞噬作用(yong)(yong)。因此(ci)，PBS脂(zhi)質(zhi)(zhi)體不能(neng)代表正常健(jian)康(kang)的(de)，未阻斷(duan)的(de)，未抑(yi)制的(de)和(he)(he)未活化的(de)巨噬細胞的(de)對(dui)照(zhao)實(shi)驗。當比較氯膦(lin)酸鹽脂(zhi)質(zhi)(zhi)體和(he)(he)PBS脂(zhi)質(zhi)(zhi)體的(de)作用(yong)(yong)時(shi)(shi)，其作用(yong)(yong)因此(ci)可(ke)能(neng)小(xiao)于預期。

有關(guan)更多(duo)信息(xi)，請參見(jian)：

– Van Rooijen，N.和(he)Sanders，A.（1994）。脂質體介導的巨噬(shi)細胞耗竭(jie)：作(zuo)用機理(li)，脂質體制(zhi)備(bei)和(he)應用。免(mian)疫學雜志，174（1-2），83-93。

– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和van den Berg，TK（1996）。脂質體介導的(de)氯膦酸鹽和丙am的(de)細(xi)胞內(nei)遞送誘(you)導的(de)巨噬細(xi)胞凋亡。免疫學(xue)雜志，193（1），93-99。

巨噬細胞清除ClodronateLiposomes氯膦酸二鈉脂質體巨噬細胞清除劑

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