ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

產品簡介：

清(qing)除巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(depletion of macrophages)是研(yan)究巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)功能的(de)(de)(de)重要方法。荷蘭阿姆斯(si)特丹Vrije University 的(de)(de)(de)Nico van Rooijen教授開發的(de)(de)(de)一(yi)款Clodronate Liposomes，可以利用巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)內吞機制，將脂(zhi)質(zhi)體包(bao)裹的(de)(de)(de)膜(mo)不通透性的(de)(de)(de)氯磷(lin)酸(suan)(clodronate)帶入細(xi)(xi)(xi)胞(bao)內，利用“特洛伊木馬機制"從而達(da)到(dao)去除巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)。

作用原理:

兩親(qin)性磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)分子在(zai)水(shui)中可以(yi)形成同心圓(yuan)形式(shi)的(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分子層(ceng)球體(ti)，磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分子層(ceng)中間通過水(shui)相分隔。溶(rong)解在(zai)水(shui)溶(rong)液中的(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)在(zai)形成脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)的(de)(de)過程(cheng)中被包裹(guo)進磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分子層(ceng)之間的(de)(de)水(shui)相中(如圖1)。游離(li)的(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)不(bu)能(neng)自由的(de)(de)通過脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)的(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)分子層(ceng)。隨著脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)被巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)吞噬(shi)(shi)，在(zai)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)溶(rong)酶體(ti)磷(lin)(lin)酸酶的(de)(de)作用(yong)下，溶(rong)解在(zai)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)水(shui)相中的(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)就可以(yi)被逐步釋(shi)放(fang)出(chu)來(lai)，并累積(ji)在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)內，當(dang)其達(da)到(dao)一定濃度時，巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)將會(hui)受到(dao)不(bu)可逆轉的(de)(de)損(sun)傷，從而進入凋亡(wang)(wang)過程(cheng)。從死亡(wang)(wang)的(de)(de)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)中釋(shi)放(fang)出(chu)來(lai)的(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)外的(de)(de)半衰期極短(大約15min)，可以(yi)通過泌尿系(xi)統排除體(ti)外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽脂質體和對照脂質體（PBS）

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體CP-005-005構成(cheng)：

氯膦酸鹽脂質體：

由同(tong)心磷脂雙層(ceng)構成(cheng)的(de)人造球，該雙層(ceng)包(bao)裹著含有(you)氯膦酸鹽(yan)的(de)PBS（磷酸鹽(yan)緩沖液(ye)）水(shui)溶液(ye)。脂質(zhi)體是顆(ke)粒(li)，大小大。3微米。它們在(zai)PBS中(zhong)形(xing)成(cheng)懸(xuan)浮(fu)液(ye)，在(zai)儲存時會沉淀，在(zai)試(shi)管(guan)或燒瓶(ping)的(de)底部形(xing)成(cheng)沉淀。在(zai)對(dui)實驗(yan)動(dong)物給(gei)藥之前，應先搖(yao)晃(huang)懸(xuan)浮(fu)液(ye)，以(yi)回(hui)收均勻的(de)懸(xuan)浮(fu)液(ye)。

對照脂質體（PBS）：

對照(zhao)脂質(zhi)體(ti)不含(han)氯膦酸(suan)鹽。它們僅含(han)有PBS，可用于(yu)對照(zhao)實驗(yan)，以查明注射(she)氯膦酸(suan)鹽脂質(zhi)體(ti)后觀(guan)察(cha)到的效果是(shi)(shi)否僅是(shi)(shi)由于(yu)巨噬細胞(bao)耗竭(jie)所致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產(chan)品描述

磷(lin)脂雙層由(you)磷(lin)脂酰膽堿(jian)和膽固醇組(zu)成。將(jiang)所有脂質體制劑(ji)懸浮在無(wu)菌磷(lin)酸鹽緩沖鹽水（PBS）中：

– 10 mM的Na2HPO4；

– 10毫(hao)米(mi)NaH2PO4；

– 140毫米氯化鈉。

我們所有(you)的(de)脂質體均帶負電荷，因此不會一起阻塞。懸浮(fu)液中的(de)脂質體沒有(you)大(da)小，這意味著它也(ye)包含越來越大(da)的(de)脂質體（大(da)3微米）。平均而(er)言，脂質體的(de)大(da)小為1.7微米。

氯膦(lin)酸(suan)(suan)鹽脂(zhi)質體：人工制備(bei)的(de)脂(zhi)質囊泡(pao)的(de)懸(xuan)浮液(ye)，包裹了氯膦(lin)酸(suan)(suan)鹽。懸(xuan)浮液(ye)中氯膦(lin)酸(suan)(suan)鹽的(de)濃度(du)約(yue)為。5毫克/毫升 氯膦(lin)酸(suan)(suan)鹽以(yi)CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的(de)形式封裝在脂(zhi)質體囊泡(pao)中。

PBS脂質體：人工制備的(de)脂質囊泡的(de)懸浮液，其中包裹(guo)了(le)PBS水溶液。這些不含氯膦(lin)酸鹽(yan)，可(ke)用于(yu)對照(zhao)實驗。

熒(ying)(ying)光(guang)DiI脂質(zhi)體：人工制備的(de)(de)脂質(zhi)囊泡的(de)(de)懸浮液，其中包封了(le)PBS水(shui)溶液，并用熒(ying)(ying)光(guang)染料DiI標記(ji)。它們不(bu)含氯膦酸(suan)鹽，可用于(yu)研究通(tong)過(guo)特(te)定(ding)給藥(yao)途徑注射的(de)(de)脂質(zhi)體是(shi)否能夠(gou)到達要研究的(de)(de)巨噬細胞。

儲存和使用(yong)說(shuo)明

到達脂質體后，應將其(qi)儲存(cun)在4 – 8oC（或39 – 47oF）之間。脂質體懸浮液(ye)不得冷凍，也不要暴(bao)露(lu)于高溫下(xia)。這(zhe)可(ke)(ke)能會對磷脂雙層造成干擾，可(ke)(ke)能導致氯膦酸鹽從脂質體中泄漏出(chu)來。

給藥前，首先使脂質(zhi)體達到室溫(wen)，然后(hou)輕輕搖動(dong)或(huo)攪拌懸浮液(ye)。一段時間后(hou)，脂質(zhi)體易(yi)于沉淀(dian)，導致(zhi)小瓶中的分(fen)布不均勻。當(dang)注射(she)(she)花(hua)費太多(duo)時間時，脂質(zhi)體甚至可(ke)能(neng)在(zai)注射(she)(she)器(qi)中沉淀(dian)。如果使用同(tong)一注射(she)(she)器(qi)注射(she)(she)多(duo)只動(dong)物(wu)，可(ke)能(neng)會(hui)導致(zhi)劑量不同(tong)。

不(bu)建議稀釋懸浮液，但(dan)如有必要，請使用PBS或(huo)鹽水。

我們建議客戶在(zai)發(fa)貨后(hou)16周內使用脂質體(ti)制(zhi)劑。強烈建議不要在(zai)到期(qi)日期(qi)之(zhi)后(hou)使用。在(zai)此期(qi)間之(zhi)后(hou)，污染的風險(xian)會增加(jia)，并且(qie)可能會發(fa)生輕微的功(gong)能喪失。

作用機理

巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在免疫和非免疫防(fang)御機制(zhi)中起重要作用(yong)。它(ta)(ta)們(men)是(shi)抵御滲透(tou)到脊椎動物(wu)體(ti)(ti)內的細(xi)(xi)菌，病毒和其他形式的微生物(wu)污染的首道防(fang)線。巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)大型細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，幾乎存在于所(suo)有身體(ti)(ti)組織中，它(ta)(ta)們(men)可以(yi)具有不(bu)同的形式和名稱(cheng)（例如庫普弗細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，肺泡巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，小膠質細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，破骨細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，紅髓(sui)巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)）。巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)“清除"，它(ta)(ta)們(men)攝入并消(xiao)化可能(neng)是(shi)潛在病原(yuan)體(ti)(ti)的所(suo)有異(yi)物(wu)，微生物(wu)，癌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和細(xi)(xi)胞(bao)(bao)碎片。該過(guo)程稱(cheng)為吞噬(shi)(shi)(shi)作用(yong)。巨(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)主要通過(guo)可溶性分子如細(xi)(xi)胞(bao)(bao)因子和趨(qu)化因子的介導來進(jin)一步調節許(xu)多非吞噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的功能(neng)。他們(men)參(can)與(yu)先天免疫，

脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)是人工(gong)制(zhi)備(bei)的(de)球(qiu)體(ti)(ti)，由同心磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層組成(cheng)(cheng)。當磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)(fen)散在(zai)水(shui)中時，親水(shui)性(xing)頭部(bu)(bu)將(jiang)構成(cheng)(cheng)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)的(de)兩個外部(bu)(bu)部(bu)(bu)分(fen)(fen)，而疏水(shui)性(xing)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)肪酸(suan)基團將(jiang)構成(cheng)(cheng)內(nei)(nei)部(bu)(bu)部(bu)(bu)分(fen)(fen)（見圖1）。水(shui)室分(fen)(fen)隔雙(shuang)(shuang)層，親水(shui)分(fen)(fen)子可(ke)以(yi)溶(rong)解在(zai)其中，形成(cheng)(cheng)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)包(bao)封的(de)分(fen)(fen)子。氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)（二(er)氯(lv)(lv)(lv)亞(ya)甲基雙(shuang)(shuang)膦(lin)(lin)酸(suan)酯或(huo)Cl2MBP）是一種親水(shui)性(xing)分(fen)(fen)子，可(ke)以(yi)封裝在(zai)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層中。游離氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)不易穿(chuan)過(guo)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)，并通(tong)(tong)過(guo)腎臟(zang)系統從循環中迅速(su)清除(chu)（即數(shu)分(fen)(fen)鐘(zhong)內(nei)(nei)）。但是，氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)包(bao)埋在(zai)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)中時，會(hui)被巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)吞噬(shi)，無法(fa)逃脫（見圖2）。磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層被溶(rong)酶(mei)體(ti)(ti)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)酶(mei)消化，而氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)未(wei)被消化并且(qie)保留在(zai)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)中。巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)攝入的(de)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)雙(shuang)(shuang)層和脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)體(ti)(ti)越多，在(zai)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)內(nei)(nei)積累的(de)氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)越多。超過(guo)一定的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)內(nei)(nei)濃度，氯(lv)(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)將(jiang)通(tong)(tong)過(guo)啟動程序性(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)死(si)亡（即凋亡）來消除(chu)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)。

圖(tu)(tu)1.氯(lv)膦酸(suan)鹽脂(zhi)質體(ti)的示意圖(tu)(tu)。囊(nang)泡由同心的磷脂(zhi)雙層(ceng)構(gou)成(cheng)，被(bei)水性隔室(shi)隔開(kai)。雙層(ceng)由親水和疏(shu)水基團組成(cheng)。將氯(lv)膦酸(suan)鹽（在此以黑色(se)方塊表示）溶解在水溶液中(zhong)并封(feng)裝在脂(zhi)質體(ti)內。

圖2.巨噬(shi)(shi)細胞對(dui)氯(lv)膦酸鹽脂(zhi)質體的攝(she)取(qu)和消化示意圖。巨噬(shi)(shi)細胞通(tong)過(guo)胞吞作用攝(she)入氯(lv)膦酸鹽脂(zhi)質體，然后與含有(you)磷脂(zhi)酶的溶酶體（L）融(rong)合(he)（箭(jian)頭）。磷脂(zhi)酶破壞的磷脂(zhi)雙層越多(duo)，在巨噬(shi)(shi)細胞內釋放的氯(lv)膦酸鹽（黑色方(fang)塊(kuai)）越多(duo)。巨噬(shi)(shi)細胞終通(tong)過(guo)凋亡被殺死。（N =巨噬(shi)(shi)細胞核）。

因此，氯膦酸(suan)鹽(yan)(yan)脂質(zhi)(zhi)體可(ke)(ke)用于通過消耗巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞來(lai)研究巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞功(gong)能(neng)。例如(ru)，它們可(ke)(ke)以應用于各種自身免(mian)疫性疾病，移植，神經系統(tong)疾病和(he)基因治療的(de)模(mo)型。氯膦酸(suan)鹽(yan)(yan)脂質(zhi)(zhi)體只有在可(ke)(ke)以達(da)到的(de)情況下才能(neng)耗盡巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞。一些組(zu)織可(ke)(ke)以形(xing)成(cheng)脂質(zhi)(zhi)體的(de)屏(ping)障。通過選(xuan)擇氯膦酸(suan)鹽(yan)(yan)脂質(zhi)(zhi)體的(de)正確(que)給藥途徑，可(ke)(ke)以耗盡特定的(de)器(qi)官或組(zu)織的(de)巨(ju)噬(shi)(shi)細(xi)胞。有關管理協(xie)議的(de)更多信息(xi)，請單擊此處。

PBS脂(zhi)質體(ti)主要用于(yu)對(dui)照(zhao)實驗。但(dan)是，這些(xie)也可以在(zai)某些(xie)時(shi)間段內通(tong)過飽和(he)來阻止吞噬(shi)作用。因(yin)此(ci)，PBS脂(zhi)質體(ti)不(bu)能代表(biao)正常健康的(de)，未(wei)阻斷的(de)，未(wei)抑(yi)制的(de)和(he)未(wei)活化的(de)巨噬(shi)細(xi)胞的(de)對(dui)照(zhao)實驗。當比較氯膦酸鹽脂(zhi)質體(ti)和(he)PBS脂(zhi)質體(ti)的(de)作用時(shi)，其作用因(yin)此(ci)可能小于(yu)預(yu)期。

有關更多信息，請參(can)見：

– Van Rooijen，N.和Sanders，A.（1994）。脂質體介導(dao)的巨(ju)噬細胞耗竭：作用機(ji)理，脂質體制備(bei)和應(ying)用。免(mian)疫學雜志，174（1-2），83-93。

– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和van den Berg，TK（1996）。脂質體介導(dao)的(de)氯膦酸鹽和丙am的(de)細(xi)胞內(nei)遞(di)送誘導(dao)的(de)巨(ju)噬細(xi)胞凋(diao)亡。免疫(yi)學雜志(zhi)，193（1），93-99。

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