鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads

Click Chemistry Tools manufactures Streptavidin Magnetic Beads with one of the highest biotin binding capacities on the market (>12 nmol of biotin per mg). Higher binding translates into reduced bead mass required to immobilize a biotinylated sample and lower background noise from nonspecific binding, resulting in better signals and lower net costs. The beads are 1.0 µm in diameter and bind at least 12 nmol of free biotin per milligram of beads. The beads also have excellent magnetic properties for rapid and efficient capture using a variety of magnetic stands.

Click Chemistry Tools生(sheng)(sheng)產的(de)鏈霉親和(he)素磁珠具有市場上ZUI高的(de)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素結合能力之一(yi)（每毫(hao)克> 12 nmol生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素）。 更(geng)高的(de)結合力可(ke)減(jian)少(shao)固定生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素化樣(yang)品所需的(de)珠子質(zhi)量，并降(jiang)低非特異性(xing)結合的(de)背(bei)景(jing)噪(zao)音，從而(er)產生(sheng)(sheng)更(geng)好的(de)信(xin)號并降(jiang)低凈成本(ben)。 珠的(de)直徑為1.0 µm，每毫(hao)克珠至少(shao)結合12 nmol的(de)游離生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素。 磁珠還具有出色的(de)磁性(xing)，可(ke)使用(yong)各種(zhong)磁力架快速(su)有效地捕獲。

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鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads

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原理介紹：

1.鏈(lian)霉/親和素

 親(qin)和(he)素(su)主要包(bao)括卵白親(qin)和(he)素(su)、鏈(lian)親(qin)和(he)素(su)、卵黃親(qin)和(he)素(su)及類親(qin)和(he)素(su)等(deng)。后兩種因其特(te)異性親(qin)和(he)力(li)低，研(yan)究不(bu)多，前兩種目前已深入研(yan)究并得到(dao)廣(guang)泛應用。

親(qin)和素(su)(su)是一(yi)種糖蛋(dan)白，可(ke)由蛋(dan)清中(zhong)(zhong)提取。分子量(liang)60kD，pI 10~10.5;在pH9~13緩(huan)沖液中(zhong)(zhong)性質均穩定，耐(nai)熱并耐(nai)多種蛋(dan)白水解(jie)酶的(de)作用(yong)。天然親(qin)和素(su)(su)為堿性蛋(dan)白，由4個相同的(de)亞(ya)單位構(gou)成(cheng)4聚體;每個親(qin)和素(su)(su)亞(ya)單位通過其結構(gou)中(zhong)(zhong)的(de)色氨酸殘基與(yu)生物素(su)(su)中(zhong)(zhong)的(de)Ureido環(I環)結合(he)。因(yin)此，1個親(qin)和素(su)(su)分子存在4個與(yu)生物素(su)(su)分子結合(he)位點，其結合(he)常數(shu)(Ka)高 達1015mol/L。

鏈霉親(qin)和素(SA)是與親(qin)和素(A)有(you)類似生(sheng)物(wu)學特性的一種(zhong)蛋白質。是由Streptomyces avidin菌在培養過程中分(fen)(fen)(fen)泌的一種(zhong)蛋白質產物(wu)，SA也(ye)可(ke)(ke)通過基因工程手段生(sheng)產。SA分(fen)(fen)(fen)子(zi)量為65000，由4條序列相(xiang)同(tong)(tong)的肽鏈構成(cheng)，每條SA肽鏈可(ke)(ke)以結合1個生(sheng)物(wu)素分(fen)(fen)(fen)子(zi)。因此(ci)與A一樣，每個SA分(fen)(fen)(fen)子(zi)也(ye)具有(you)4個可(ke)(ke)與生(sheng)物(wu)素分(fen)(fen)(fen)子(zi)結合位點，其結合常數與A相(xiang)同(tong)(tong)為1015mol/L。約為抗原(yuan)抗體間(jian)ka(105~1011 mol/L)的1萬倍以上。

SA與(yu)A的ka雖然相同，但在(zai)實際(ji)應(ying)用中(zhong)(zhong)其檢測(ce)靈敏度明(ming)顯優于A，其原因是SA為 略偏酸(suan)(suan)性的蛋白。SA的每條肽(tai)鏈(lian)含(han)159個氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)殘基(ji)，其中(zhong)(zhong)賴氨(an)酸(suan)(suan)、精氨(an)酸(suan)(suan)等堿性氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)的含(han)量比一(yi)(yi)般(ban)親合(he)素少，反之含(han)酸(suan)(suan)性氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)較(jiao)(jiao)多，其等點(dian)為6.0，較(jiao)(jiao)A(pI=10)為低，同時(shi)(shi)在(zai)結構(gou)中(zhong)(zhong)SA不(bu)含(han)任何糖基(ji)，而(er)A含(han)糖可高達(da)10%。A的高pI及高含(han)糖結構(gou)導致在(zai)聚苯(ben)乙烯板和(he)硝酸(suan)(suan)纖維素膜上或與(yu)組織(zhi)細胞DNA結合(he)時(shi)(shi)，易產生一(yi)(yi)定(ding)程度的非特異性結合(he)，造成(cheng)較(jiao)(jiao)高的顯色背景，而(er)SA較(jiao)(jiao)A在(zai)應(ying)用中(zhong)(zhong)明(ming)顯克服了這(zhe)一(yi)(yi)缺點(dian)。

SA的活性(xing)可(ke)達(da)18u,較A高(15u);與A一樣(yang)，每個SA分(fen)子也具(ju)有(you)4個可(ke)與生物素分(fen)子結合(he)位點，故其(qi)效應相同(tong)。

2.生物素

生物素(su)(su)(su)(Biotin)為B族維生素(su)(su)(su)之一(yi)，又稱(cheng)維生素(su)(su)(su)H、維生素(su)(su)(su)B7、輔酶(mei)R(Coenzyme R)等。是(shi)20世紀(ji)30年代在(zai)研究酵母生長因(yin)(yin)子和根瘤菌的(de)生長與呼吸促進(jin)因(yin)(yin)子時，從(cong)肝(gan)中(zhong)發現的(de)一(yi)種可以防治由(you)于喂食生雞蛋蛋白誘導的(de)大(da)鼠脫(tuo)毛和皮(pi)膚(fu)損傷的(de)因(yin)(yin)子。生物素(su)(su)(su)是(shi)水(shui)溶性維生素(su)(su)(su)B群成員。

生(sheng)物(wu)素(su)(biotin，B)廣(guang)泛分(fen)(fen)布于動、植(zhi)物(wu)組(zu)織中(zhong)，常(chang)從含量較高的(de)(de)卵黃(huang)和肝組(zu)織中(zhong)提取，分(fen)(fen)子量244.biotin31Da.生(sheng)物(wu)素(su)分(fen)(fen)子有兩個環狀結(jie)構(如圖)，其(qi)中(zhong)Ⅰ環為咪唑酮(tong)環，是與親和素(su)結(jie)合(he)的(de)(de)主要部(bu)位(wei);II環為噻吩環，C2上有一戊酸(suan)側(ce)鏈，其(qi)末端(duan)羧基是結(jie)合(he)抗體和其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)大分(fen)(fen)子的(de)(de)結(jie)構，經化學(xue)修飾后(hou)，生(sheng)物(wu)素(su)可成為帶(dai)有多種活性基團的(de)(de)衍(yan)生(sheng)物(wu)--活化生(sheng)物(wu)素(su)。活化生(sheng)物(wu)素(su)可以在蛋(dan)白(bai)質(zhi)交聯(lian)劑的(de)(de)介導下，與已知的(de)(de)幾乎(hu)所有生(sheng)物(wu)大分(fen)(fen)子偶聯(lian)，包括蛋(dan)白(bai)質(zhi)，核酸(suan)，多糖，脂(zhi)類等。

3.鏈(lian)親和素(su)-生物素(su)系統

生(sheng)(sheng)物素-親和(he)素系(xi)(xi)(xi)統(tong)(Biotin-Avidin-System，BAS)是70年代末發展起(qi)來的(de)一種(zhong)(zhong)新型生(sheng)(sheng)物反(fan)應放大(da)系(xi)(xi)(xi)統(tong)。隨(sui)著各種(zhong)(zhong)生(sheng)(sheng)物素衍生(sheng)(sheng)物的(de)問世，BAS很快被廣泛應用(yong)(yong)于醫學各領域(yu)。近年大(da)量研究(jiu)證(zheng)實(shi)，生(sheng)(sheng)物素-親和(he)素系(xi)(xi)(xi)統(tong)幾(ji)乎可與(yu)(yu)目前研究(jiu)成(cheng)功(gong)的(de)各種(zhong)(zhong)標記(ji)物結合(he)(he)。生(sheng)(sheng)物素與(yu)(yu)親和(he)素之間高親合(he)(he)力(li)的(de)牢固結合(he)(he)以及多級(ji)放大(da)效應，使BAS免疫標記(ji)和(he)有關(guan)示蹤分析更加靈敏(min)。它(ta)已成(cheng)為(wei)目前廣泛用(yong)(yong)于微量抗原、抗體定性、定量檢測及定位觀(guan)察(cha)研究(jiu)的(de)新技術。

原理示意圖

BAS系(xi)統的優勢

BAS在(zai)實(shi)際應用中所具有的(de)巨大優越性，主要表(biao)現在(zai)以下幾個(ge)方面。

靈敏度(du)

生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)容易與蛋白質和核酸(suan)類等生(sheng)(sheng)物(wu)大(da)(da)分(fen)子(zi)結合，形成的(de)生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)衍(yan)生(sheng)(sheng)物(wu)，不僅保持了大(da)(da)分(fen)子(zi)物(wu)質的(de)原(yuan)有生(sheng)(sheng)物(wu)活性，而且比恬度高，具多(duo)價性。此外，每個親和素(su)分(fen)子(zi)有四個生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)結合部位，可同時以多(duo)價形式結合生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)化(hua)的(de)大(da)(da)分(fen)子(zi)衍(yan)生(sheng)(sheng)物(wu)和標記物(wu)。因此，BAS具有多(duo)級放(fang)大(da)(da)作用(yong)(yong)，使(shi)其在應用(yong)(yong)時可極大(da)(da)地提高檢測方(fang)法的(de)靈敏(min)度。

特異性

親和(he)素與生物素間的(de)(de)(de)結合具(ju)有*的(de)(de)(de)親和(he)力，其反應呈高(gao)度專一性。因(yin)此，BAS的(de)(de)(de)多層次放大(da)作用(yong)在提高(gao)靈敏度的(de)(de)(de)同時，并不增加非(fei)特(te)異性干擾。而(er)且，BAS結合特(te)性不會因(yin)反應試(shi)劑的(de)(de)(de)高(gao)度稀(xi)釋而(er)受(shou)影(ying)響，使其在實(shi)際應用(yong)中可大(da)限度地降(jiang)低反應試(shi)劑的(de)(de)(de)非(fei)特(te)異作用(yong)。

穩定性

親和(he)素結合(he)(he)生(sheng)物素的(de)親和(he)常(chang)數可(ke)為抗原-抗體反應(ying)的(de)百萬倍，二者(zhe)結合(he)(he)形成復合(he)(he)物的(de)解離常(chang)數很小(xiao)，呈不可(ke)逆(ni)反應(ying)性(xing);而且酸、堿(jian)、變性(xing)劑、蛋白溶(rong)解酶以及有機溶(rong)劑均不影響其結合(he)(he)。因此(ci)，BAS在(zai)實(shi)際應(ying)用中，產物的(de)穩定性(xing)高，從而可(ke)降低操作誤差，提高測定的(de)精確度。

普適性

生物(wu)素-親(qin)和素系(xi)統(tong)(tong)的多功能性(xing)還能提供一(yi)套統(tong)(tong)一(yi)的研究方法。例如對于(yu)某待測分子，已(yi)經得到(dao)了對于(yu)該分子的生物(wu)素標(biao)記(ji)抗(kang)原，那么配合(he)結合(he)親(qin)和素的膠體金可以(yi)在電(dian)鏡(jing)下觀測，配合(he)結合(he)熒光標(biao)記(ji)的親(qin)和素可以(yi)使用流(liu)式細(xi)胞儀篩(shai)選，配合(he)連接到(dao)酶(mei)的親(qin)和素可以(yi)進行ELISA等免疫組化(hua)實驗。

其他

BAS可依據具(ju)體實(shi)驗(yan)(yan)方法要(yao)求制(zhi)成(cheng)(cheng)多種通用(yong)(yong)性(xing)試劑(如生物(wu)素(su)化第二抗體等(deng))適用(yong)(yong)于不同的(de)(de)(de)反應體系(xi)，而且都(dou)可高度稀釋，用(yong)(yong)量很少，實(shi)驗(yan)(yan)成(cheng)(cheng)本低(di);尤其是(shi)BAS與成(cheng)(cheng)本高昂的(de)(de)(de)抗原特異(yi)性(xing)抗體偶聯使用(yong)(yong)，可使后者(zhe)的(de)(de)(de)用(yong)(yong)量大幅(fu)度減少，節約(yue)實(shi)驗(yan)(yan)費(fei)用(yong)(yong).此外，由(you)于生物(wu)素(su)與親(qin)和(he)素(su)的(de)(de)(de)結合具(ju)高速、高效的(de)(de)(de)特性(xing)，盡(jin)管(guan)BAS的(de)(de)(de)反應層(ceng)次較多，但(dan)所需的(de)(de)(de)溫育(yu)時間不長，實(shi)驗(yan)(yan)往往只需數小時即可完成(cheng)(cheng)