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Midori Green Advance核酸染料

更新時間:2023-07-28

簡要描述:

MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance是(shi)傳統核(he)酸染色(se)劑溴(xiu)化乙錠的安全(quan)替(ti)代品。 它是(shi)一種(zhong)非致(zhi)癌性和低致(zhi)突(tu)變性染料(liao),具(ju)有(you)很高的靈敏度(du),可用于(yu)檢(jian)測瓊脂糖凝膠中(zhong)的dsDNA,ssDNA和RNA。 MIDORIGreen Advance可以與(yu)紫外線或我們(men)創(chuang)新的藍/綠LED技(ji)術結合使(shi)用。

Catalogue number: MG04(貨號:MG04)

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining(1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染(ran)色(se)劑,用于凝膠或(huo)后染(ran)色(se))

Benefits(優點):

  • Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels(瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內染色)
  • No toxicity, non-carcinogenic(無毒,無致癌性)
  • Safe alternative to ethidium bromide(溴化乙錠的安全替代品
  • High fluorescence(高熒光)
  • Optimal for UV-light(優化(hua)適(shi)合紫(zi)外線)

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下一代凝膠內染色

MIDORIGreen Advance是第(di)二代非致(zhi)癌染料(liao)。 經過紫外線(xian)或藍/綠光(guang)激(ji)發(fa)后,信號更優化。 它保持了諸如(ru)非致(zhi)癌性和優異的信噪比(bi)等優勢。 如(ru)圖所(suo)示。 1當使用Blue / Green LED技術時(shi),MIDORIGreen Advance比(bi)溴乙錠更好。

圖1:使(shi)用藍(lan)/綠(lv)LED透射照(zhao)明(ming)器(qi)比較MIDORIGreen Advance(左綠(lv)色)和溴化乙錠(右紅色)的(de)靈敏度。


MIDORIGreen Advance即使對于(yu)較(jiao)小的(de)DNA片段(duan)也(ye)顯示出很高的(de)靈敏度。 MIDORIGreen Advance的(de)稀釋(shi)倍(bei)數可高達1:25000。 因此(ci),對于(yu)100 ml瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠染色,4-6μl足夠,導致?17至25升染色的(de)瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠。


經驗證的安全性

良好地替代(dai)誘變的(de)(de)DNA染色劑溴化乙錠以傳遞強信號(hao)是*的(de)(de)。 MIDORIGreen Advance發出的(de)(de)信號(hao)強度相當。 但(dan)是,不得危及(ji)用戶的(de)(de)安(an)全。 因此,使用MIDORIGreen Advance進行了幾次測(ce)試(shi),根(gen)據這些(xie)測(ce)試(shi),MIDORIGreen Advance是安(an)全的(de)(de)。

 

染色Protocol:

凝膠內染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液(濃度為0.8-3.0%)并加熱,直到溶液*澄清,看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain,輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC,然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時,加載樣品并進行電泳。
使用UV或LED照明器(qi)檢測波段。黃色(se)或綠色(se)的明膠或玻璃紙(zhi)濾鏡應(ying)用于攝(she)影。


后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應優選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠,每100 ml緩沖液應使用10-25 µl的污漬。
合適的(de)染色(se)時間(5 – 60分鐘(zhong))和污漬的(de)數量可能(neng)取決于凝膠的(de)厚度。


注意:不建議(yi)將(jiang)SDS包含在(zai)加載(zai)緩沖液中(zhong)使用(yong),因為由污點(dian)和(he)SDS相互作用(yong)引起的(de)條帶外(wai)觀!

 

客戶常見問題解答(FAQ)

問:我(wo)可(ke)以將Midori Green Advance與脈沖場凝膠電泳(yong)(PFGE)一起使(shi)用(yong)嗎?通常(chang),我(wo)使(shi)用(yong)EtBr進(jin)行后期處理。

答(da):您可以(yi)在“Protocol”部分中(zhong)找到進(jin)行后染(ran)色(se)的方(fang)案(an)。

 

問:您是否(fou)有處置Midori Green Advance的詳細信(xin)息?我了(le)解(jie)該(gai)分子對光敏(min)感,我想知道MGA凝(ning)膠在(zai)使用后是否(fou)可以在(zai)處置前暴露于光下?

答:MGA無毒,足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發射率會被光破壞,但這并不意味著化學結構會發生變化。但是沒有必要破壞分子,因為它仍然無害。與溴化乙錠相比,這是*的優勢–無需特殊處理。

 

問(wen):為什(shen)么不能以(yi)相同方式使用MGA和MGD?

答:化學結(jie)構(gou)*不(bu)(bu)(bu)同(tong)。我們(men)(men)測試(shi)(shi)過(guo)將MGD用(yong)(yong)作(zuo)MGA,反之亦然。我們(men)(men)不(bu)(bu)(bu)能同(tong)時(shi)推薦這(zhe)兩種(zhong)應用(yong)(yong)。當您嘗(chang)試(shi)(shi)將MGD用(yong)(yong)作(zuo)MGA時(shi),您需要大量MGD和階(jie)梯才能獲(huo)得(de)可觀(guan)察的(de)(de)(de)(de)波段。通過(guo)這(zhe)種(zhong)方(fang)(fang)式(shi)可以檢測不(bu)(bu)(bu)到(dao)低(di)(di)濃(nong)(nong)度的(de)(de)(de)(de)樣品(pin)。 MGD設計(ji)用(yong)(yong)于添加(jia)樣品(pin),并且濃(nong)(nong)縮程度遠低(di)(di)于MGA。以MGA之類的(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)式(shi)使用(yong)(yong)MGD是非(fei)常(chang)不(bu)(bu)(bu)經濟的(de)(de)(de)(de)–您需要在凝膠中(zhong)添加(jia)10倍以上的(de)(de)(de)(de)量才能觀(guan)察條帶。當您嘗(chang)試(shi)(shi)將MGA用(yong)(yong)作(zuo)MGD時(shi),也會出現問(wen)題,因為MGA的(de)(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度過(guo)高(gao),并且運行方(fang)(fang)向相反。我試(shi)(shi)圖降低(di)(di)MGA濃(nong)(nong)度,在這(zhe)種(zhong)情況(kuang)下,您會看到(dao)一些條帶,但它(ta)們(men)(men)與(yu)所(suo)使用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)稀釋(shi)液無關,非(fei)常(chang)弱。總結(jie)一下,您可以說兩種(zhong)染(ran)料都是針對(dui)不(bu)(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)應用(yong)(yong)(在凝膠中(zhong)和添加(jia)到(dao)樣品(pin)中(zhong))設計(ji)的(de)(de)(de)(de)(具有不(bu)(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)結(jie)構(gou)式(shi))和優(you)化的(de)(de)(de)(de),因此不(bu)(bu)(bu)建議(yi)嘗(chang)試(shi)(shi)以其他方(fang)(fang)式(shi)使用(yong)(yong)它(ta)們(men)(men)。

 

問:MGA和MGD有(you)什么區別?這些污漬的(de)穩定性如何(he)?

答(da):主要區別在(zai)(zai)于Midori Green Advance(MGA)用(yong)于凝膠(jiao)和后(hou)染(ran)色(se)(se)(意味著它(ta)像溴化乙錠一樣使(shi)(shi)用(yong)),而Midori Green Direct(MGD)直接添(tian)加(jia)到樣品中。根據凝膠(jiao)文檔系統的(de)不同,我(wo)們(men)建(jian)議(yi)您(nin)使(shi)(shi)用(yong)一種或(huo)另一種,但您(nin)可(ke)以(yi)在(zai)(zai)每種照(zhao)(zhao)明(ming)器(qi)(qi)(UV 302、365 nm,藍色(se)(se)照(zhao)(zhao)明(ming)器(qi)(qi)和藍色(se)(se)/綠色(se)(se)透射照(zhao)(zhao)明(ming)器(qi)(qi))中同時使(shi)(shi)用(yong)這兩種照(zhao)(zhao)明(ming)器(qi)(qi)–只(zhi)有性(xing)能可(ke)以(yi)提高到合(he)適(shi)水平。例如,如果用(yong)戶使(shi)(shi)用(yong)UV透照(zhao)(zhao)器(qi)(qi),我(wo)們(men)建(jian)議(yi)使(shi)(shi)用(yong)MGA,因為(wei)使(shi)(shi)用(yong)該色(se)(se)斑的(de)效果非(fei)常(chang)好。我(wo)們(men)的(de)藍/綠色(se)(se)LED儀(yi)器(qi)(qi)和MGD可(ke)帶來非(fei)常(chang)出色(se)(se)的(de)性(xing)能-*沒有背景,而且信號(hao)強度很高。兩種污漬在(zai)(zai)室溫下均穩定,因此在(zai)(zai)室溫下運輸(shu)沒有問(wen)題(ti),但我(wo)們(men)建(jian)議(yi)將污漬保存在(zai)(zai)4°C下。

 

問:MGA和MGD是否(fou)可以與瓊脂(zhi)糖和丙烯酰胺(an)凝(ning)膠一起使(shi)用(yong)?

答(da):我(wo)們(men)的客戶給我(wo)們(men)反饋說MDG和MGA(染色后)可用于丙烯酰胺凝膠,但主要是為(wei)瓊脂(zhi)糖凝膠設計的。

 

問:如果我將MGA在-20°C下保存6天會怎樣?可以使用嗎?

答(da):凍結會破壞(huai)MGA的(de)功能(neng)。您(nin)仍然可以嘗試,但我們的(de)經驗(yan)使冷凍后的(de)照明(ming)失(shi)效(xiao)。

 

問:我在瓊脂糖(tang)凝膠中使用(yong)Midori Green Advance,為什(shen)么在凝膠電泳35分鐘后看不(bu)見小條帶,您有什(shen)么建議?

答(da):Midori Green Advance可能帶(dai)有(you)電(dian)(dian)荷(he),并且與DNA的方向不(bu)(bu)同,因(yin)此(ci)凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)從底部脫色(se)(se)。要查看小樂隊,您可以(yi)將運行時間(jian)減少到25分鐘(zhong)。如(ru)果(guo)您想讓凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)運行更(geng)長的時間(jian),那么您可以(yi)*跡。可以(yi)使用in凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)染(ran)色(se)(se),然后(hou)縮短后(hou)染(ran)色(se)(se)時間(jian),或(huo)者只對凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)進(jin)行后(hou)染(ran)色(se)(se),而無(wu)(wu)需先進(jin)行in凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)染(ran)色(se)(se)。在這兩種情(qing)況下,整個(ge)凝(ning)(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)都(dou)會被染(ran)色(se)(se),并且觀察到非常低的分子量帶(dai)。您也可以(yi)使用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。該(gai)染(ran)料會添加到DNA中,因(yin)此(ci)無(wu)(wu)論電(dian)(dian)泳(yong)多(duo)長時間(jian),每個(ge)條帶(dai)都(dou)會被染(ran)色(se)(se)。另一個(ge)優點是不(bu)(bu)存在背景。特別(bie)是如(ru)果(guo)您使用藍(lan)色(se)(se)或(huo)藍(lan)色(se)(se)/綠色(se)(se)LED燈代替紫外線,則(ze)會收到令人驚奇的信(xin)號。

 

問:在(zai)Midori Green Advance數據表(biao)上,描述了后期處理多可以使用2-3次。您(nin)可以在(zai)不損失太多敏感(gan)性的情況(kuang)下使用發布后解(jie)決方案多長時間(jian)?

答(da):實際上,我們的客戶(hu)使用頻(pin)率超過(guo)2-3次(ci)。如(ru)果染色浴始終變暗,您(nin)可(ke)以(yi)(yi)在任何情況下使用2-3次(ci)而不會降(jiang)低信號強(qiang)度(du)。但也可(ke)以(yi)(yi)使用5 – 8次(ci)而不會降(jiang)低信號,具體取決(jue)于凝膠的大(da)小和(he)樣品量(liang)。如(ru)果您(nin)檢測到(dao)強(qiang)度(du)降(jiang)低,則可(ke)以(yi)(yi)增加一點MGA,從而獲得與以(yi)(yi)前(qian)相同的信號強(qiang)度(du)。

 

問:到期后可以使用MGA嗎?

答:是的,您可以(yi)使用它。到期日期只(zhi)是我們保證(zheng)的短時間,但通常會持續(xu)更長的時間。

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