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懸浮細胞做好免疫熒光的關鍵步驟

更新時間:2023-02-17   點擊次數:1924次

您是否希望懸浮細(xi)胞(bao)的免疫熒光像貼(tie)壁細(xi)胞(bao)一樣(yang)容(rong)易?現在就是這樣(yang)!

靶點科技Shi-fix玻(bo)片(pian)允(yun)許(xu)懸浮細(xi)胞(bao)分(fen)層(ceng)或直接作(zuo)為單(dan)層(ceng)生(sheng)長。簡單(dan),無憂(you)的實驗方(fang)案,無需離心即可將懸浮細(xi)胞(bao)固定(ding)到(dao)載(zai)玻(bo)片(pian)上。只(zhi)需將細(xi)胞(bao)添加(jia)到(dao)載(zai)玻(bo)片(pian)上,等(deng)待30分(fen)鐘(zhong),用PBS洗(xi)滌未結(jie)合的細(xi)胞(bao)并繼續(xu)免疫染色(或繼續(xu)培養以(yi)獲得所(suo)需的細(xi)胞(bao)密度)。

這(zhe)些玻(bo)片(pian)也(ye)可用(yong)于染(ran)色懸浮(fu)細(xi)胞(bao)以(yi)(yi)進行(xing)(xing)顯微鏡檢(jian)查,或用(yong)于固定懸浮(fu)細(xi)胞(bao)以(yi)(yi)進行(xing)(xing)共聚焦顯微鏡檢(jian)查。更(geng)重要的是,如果(guo)需要,您(nin)還可以(yi)(yi)在(zai)細(xi)胞(bao)附著在(zai)玻(bo)片(pian)上時刺(ci)激它(ta)們。您(nin)可以(yi)(yi)像(xiang)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)一樣處理非(fei)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)!

關鍵步驟:

1. 使(shi)用PBS清洗細胞,并(bing)將細胞重新懸浮于PBS中(2-5 百(bai)萬個/ml)

2. 把懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞專用(yong)免疫熒光玻(bo)(bo)片(pian)放置于12孔或者6孔細(xi)(xi)胞培養板(ban)孔里,直接滴加細(xi)(xi)胞于懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞專用(yong)免疫熒光玻(bo)(bo)片(pian)上(每個玻(bo)(bo)片(pian)上20-30萬個細(xi)(xi)胞)

3. 使(shi)細(xi)胞(bao)(bao)附著30分(fen)(fen)鐘,有些細(xi)胞(bao)(bao)需要延長附著時(shi)間,但(dan)不(bu)要超過1小時(shi)。使(shi)用約2ml PBS沖洗掉未結合細(xi)胞(bao)(bao)(切勿直(zhi)接(jie)垂直(zhi)滴加PBS到玻片上細(xi)胞(bao)(bao),可將PBS滴加于板孔里側邊,然后(hou)輕輕搖晃3-5分(fen)(fen)鐘)

4. 在(zai)顯微鏡下檢查(cha)細胞附著情況,如果需要(yao)進一(yi)步培(pei)養,那么(me)加入(ru)1ml培(pei)養基即可;若不培(pei)養即可直接固定,染色。


四(si)步走,操(cao)作示(shi)意(yi)圖如下:





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